更新時(shí)間：2025-05-06
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免疫共沉淀（Co-IP）以抗體與抗原的特異性結(jié)合為基礎(chǔ)，研究蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。利用免疫共沉淀可以檢測(cè)兩個(gè)已知蛋白之間的相互作用，或者尋找與已知蛋白相互作用的未知蛋白。免疫共沉淀的優(yōu)勢(shì)在于蛋白的結(jié)合是在細(xì)胞內(nèi)完成，能夠反應(yīng)天然狀態(tài)下的蛋白質(zhì)相互作用，結(jié)果更加真實(shí)可靠。
實(shí)驗(yàn)原理
當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時(shí)，完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用被保留了下來(lái)，使用結(jié)合抗體的磁珠與細(xì)胞裂解液共同孵育，抗體會(huì)和誘餌蛋白特異性結(jié)合，同時(shí)與誘餌蛋白結(jié)合的蛋白也會(huì)固定在磁珠上，洗去上清，再將磁珠上的蛋白洗脫下來(lái)進(jìn)行免疫印跡檢測(cè)或者質(zhì)譜檢測(cè)，將鑒定到與誘餌蛋白相互作用的蛋白質(zhì)。
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實(shí)驗(yàn)結(jié)果
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