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蛋白 Pull Down（蛋白和蛋白互作）

更新時間：2025-10-20

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廠商性質：生產廠家

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簡要描述：

Halo Pull Down（蛋白和蛋白互作）技術是將Halo標簽的融合蛋白固相化到磁珠上，與細胞總蛋白進行孵育，鑒定與之相互作用的蛋白。該方法可以鑒定與已知蛋白相互作用的未知蛋白，也可以鑒定兩個已知蛋白間是否存在相互作用。

產品介紹：

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蛋白Pull down技術將目標蛋白進行體外原核表達，使標簽蛋白（Halo、GST、His等）與目標蛋白融合表達，可以不受抗體、物種限制僅借助標簽的親和介質將目標蛋白純化出來，目標蛋白在純化過程中可以將與其能夠發(fā)生作用的蛋白“下拉”下來，進而利用蛋膠、Western Blot或者質譜鑒定拉下來的蛋白質，這些蛋白即與目標蛋白相互作用的蛋白。蛋白Pull down實驗還可以通過外源同時表達目標蛋白和待測蛋白，利用Pull down點對點的確定它們是否發(fā)生直接的相互作用，也可以僅表達蛋白質的結合區(qū)域進行蛋白Pull down，確定兩個蛋白結合的結構域。

本公司主要提供Halo/GST-tag pull down：Halo-tag pull down是使用體外真核表達系統(tǒng)來表達目的蛋白，表達的目的蛋白攜帶Halo標簽；GST-tag pull down是使用大腸桿菌誘導表達目的蛋白，表達的目的蛋白攜帶GST標簽，也可以利用其它標簽蛋白進行pull down實驗。

Halo/FLAG-tag pull down技術優(yōu)勢：

真核表達系統(tǒng)，蛋白更接近體內結構

沒有細胞內干擾因素的限制，表達成功率高

蛋白表達載體構建成功后，不需要轉化和鑒定，可直接表達目的蛋白，節(jié)省時間

步驟	內容	交付內容	周期
載體構建	客戶提供目的蛋白對應的CDS的序列或質粒，克隆至合適的表達載體，質粒測序，質粒制備。	測序結果	1-2周
無細胞表達+純化	用小麥芽胚蛋白表達體系進行蛋白表達，蛋白表達評估 (Western Blot) 。	表達評估報告	1周
Pull Down	細胞裂解，目的蛋白和總蛋白孵育，洗脫與目的蛋白結合的蛋白。	銀染結果	1周
質譜檢測	將洗脫的蛋白進行質譜鑒定。	質譜結果	2周

客戶提供材料

交付結果

新鮮樣本（組織或者細胞）：細胞數量>2.7ⅹ10⁷；

組織樣本>3g

載體測序結果

實驗過程圖

質譜結果

蛋白Pull Down 技術流程

蛋白Pull Down結果示例

結果.png GO結果.png KEGG結果.png

蛋白Pull Down應用案例

2023年12月，北京林業(yè)大學和藍景科信合作，在植物學主流學術期刊Plant Stress（IF=5.0）上，發(fā)表了題為“Populus euphratica CPK21 interacts with heavy metal stress-associated proteins to mediate Cd tolerance in Arabidopsis”的研究成果。該研究借助HaloTag pull-down技術鑒定了胡楊CPK21的互作蛋白，為揭示胡楊CPK21調控植物Cd耐受的分子機制研究提供了技術支撐。