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蛋白 Pull Down（蛋白和蛋白互作）

更新時間：2025-05-05

訪問量：5092

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

生產(chǎn)地址：

簡要描述：

Halo Pull Down（蛋白和蛋白互作）技術是將Halo標簽的融合蛋白固相化到磁珠上，與細胞總蛋白進行孵育，鑒定與之相互作用的蛋白。該方法可以鑒定與已知蛋白相互作用的未知蛋白，也可以鑒定兩個已知蛋白間是否存在相互作用。

產(chǎn)品介紹：

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蛋白Pull down技術將目標蛋白進行體外原核表達，使標簽蛋白（Halo、GST、His等）與目標蛋白融合表達，可以不受抗體、物種限制僅借助標簽的親和介質(zhì)將目標蛋白純化出來，目標蛋白在純化過程中可以將與其能夠發(fā)生作用的蛋白“下拉”下來，進而利用蛋膠、Western Blot或者質(zhì)譜鑒定拉下來的蛋白質(zhì)，這些蛋白即與目標蛋白相互作用的蛋白。蛋白Pull down實驗還可以通過外源同時表達目標蛋白和待測蛋白，利用Pull down點對點的確定它們是否發(fā)生直接的相互作用，也可以僅表達蛋白質(zhì)的結合區(qū)域進行蛋白Pull down，確定兩個蛋白結合的結構域。

本公司主要提供Halo/GST-tag pull down：Halo-tag pull down是使用體外真核表達系統(tǒng)來表達目的蛋白，表達的目的蛋白攜帶Halo標簽；GST-tag pull down是使用大腸桿菌誘導表達目的蛋白，表達的目的蛋白攜帶GST標簽，也可以利用其它標簽蛋白進行pull down實驗。

Halo/FLAG-tag pull down技術優(yōu)勢：

真核表達系統(tǒng)，蛋白更接近體內(nèi)結構

沒有細胞內(nèi)干擾因素的限制，表達成功率高

蛋白表達載體構建成功后，不需要轉(zhuǎn)化和鑒定，可直接表達目的蛋白，節(jié)省時間

步驟	內(nèi)容	交付內(nèi)容	周期
載體構建	客戶提供目的蛋白對應的CDS的序列或質(zhì)粒，克隆至合適的表達載體，質(zhì)粒測序，質(zhì)粒制備。	測序結果	1-2周
無細胞表達+純化	用小麥芽胚蛋白表達體系進行蛋白表達，蛋白表達評估 (Western Blot) 。	表達評估報告	1周
Pull Down	細胞裂解，目的蛋白和總蛋白孵育，洗脫與目的蛋白結合的蛋白。	銀染結果	1周
質(zhì)譜檢測	將洗脫的蛋白進行質(zhì)譜鑒定。	質(zhì)譜結果	2周

客戶提供材料

交付結果

新鮮樣本（組織或者細胞）：細胞數(shù)量>2.7ⅹ10⁷；

組織樣本>3g

載體測序結果

實驗過程圖

質(zhì)譜結果

蛋白Pull Down 技術流程

蛋白Pull Down結果示例

結果.png GO結果.png KEGG結果.png

蛋白Pull Down應用案例

2023年12月，北京林業(yè)大學和藍景科信合作，在植物學主流學術期刊Plant Stress（IF=5.0）上，發(fā)表了題為“Populus euphratica CPK21 interacts with heavy metal stress-associated proteins to mediate Cd tolerance in Arabidopsis”的研究成果。該研究借助HaloTag pull-down技術鑒定了胡楊CPK21的互作蛋白，為揭示胡楊CPK21調(diào)控植物Cd耐受的分子機制研究提供了技術支撐。